AAV (adeno-associated virus) 是一種先天缺乏replication 能力的病毒,需要其他helper virus ( 例如腺病毒adenovirus) 的co-infection 之下才能產生AAV 病毒顆粒,此AAV Helper-Free System 利用創新的方式,將helper virus 所需的基因放入pHelper vector 中,重組有興趣的目標基因成完整的AAV 病毒顆粒,讓進入細胞的lytic phase,進而去感染其他目標宿主細胞。此轉染系統使用AAV 病毒,目前已知AAV 病毒對人不會造成疾病,另一方面此系統不需要使用adenovirus,能兼顧安全及效能,是非常好的轉染系統。
重組的AAV 是經過證實適合研究及基因治療的工具,AAV Helper-FreeSystem 有很好的基因轉染效能,同時適合用於多種的細胞類型。基因可以穩定地嵌入宿主細胞的genome 中,並且長時間表現目標蛋白,在動物細胞系統之下表現的蛋白能進行各種後轉譯修飾,是研究蛋白很好的選擇。
此系統包含五個vector 和兩種cell line,cloning vector (pAAV-MCS 和pV-CMV-MCS), 轉染control vector (pAAV-LacZ), 兩個vector 帶有產生轉染病毒所需要的基因部分 (pAAV-RC 和pHelper)。此外也可選用額外的pAAV-IRES-hrGFP,能用hrGFP 報導基因直接做viral titer,可視需要選擇使用。兩種cell line 分別為AAV-293 cell line,能產生高量的infectious particle,以及AAV HT1080 cell line,專門用於單獨的titering測定,利用此AAV-293 cell line 可產生replication-deficient 的重組病毒顆粒,只需將細胞打破即可獲得病毒顆粒,直接轉染目標細胞。
貨號 | 產品 | 數量 | |
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240071 | AAV Helper-Free System AAV無輔助病毒系統(組) 廠牌:Agilent | 1 Kit | |
240073 | AAV-293 Cells AAV-293細胞(組) 廠牌:Agilent | 1 x 10^6 cells | |
240074 | pAAV-hrGFP Vector pAAV-hrGFP 載體(組) 廠牌:Agilent | 20 µg | |
240075 | pAAV-IRES-hrGFP Vector pAAV-IRES-hrGFP 載體(組) 廠牌:Agilent | 10 µg | |
240109 | AAV-HT1080 Cells AAV-HT1080細胞(組) 廠牌:Agilent | 1 x 10^6 cells |