溫和地純化出native protein利用T7 RNA polymerase-based 的pCAL vector express 系統, 可以重組帶有calmodulin-binding peptide(CBP) tag 的目標 蛋白,重組的CBP-tagged 蛋白能經由一次步驟的calmodulin resin 溫和地進行純化,相較傳統的6xHis affinity tag 需要嚴 峻的elution 條件,更能保有蛋白原本的特質與活性。此外重 組的蛋白含有thrombin 或是enterokinase protease cleavage site 可供選擇, 經由酵素處理可移除CBP tag 來獲得native protein。高蛋白表現量pCAL vector 為T7 RNA polymerase-based 的pET-11 系列衍 生而來,含有高蛋白產量的特性,包含T7/LacO promoter 及 lacIq plasmid-borne copy,能夠更有效地調控目標蛋白的表現。 在IPTG 存在的情況下,E. coli BL21(DE3) 或BL21(DE3)pLysS 宿主細胞能產生T7 RNA polymerase, 並結合到pCAL 的T7 promoter 進行蛋白生成。CBP affinity tag 有C 端及N 端可供 選擇。
貨號 | 產品 | 數量 | |
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214303 | Calmodulin Anity Resin Calmodulin親和性樹脂 (組) 廠牌:Agilent | 10 mL | |
214301 | pCAL-c Vector pCAL-c 載體(組) 廠牌:Agilent | 20 μg | |
214302 | pCAL-n Vector pCAL-n 載體(組) 廠牌:Agilent | 20 μg | |
214310 | pCAL-n-EK Vector pCAL-n-EK載體(組) 廠牌:Agilent | 20 μg | |
214311 | pCAL-n-FLAG Vector pCAL-n-FLAG載體(組) 廠牌:Agilent | 20 μg |