Vitality hrGFP II Mammalian Expression Vectors

動物細胞用改良強化版綠螢光蛋白表現載體

綠螢光蛋白 (green fluorescent protein, GFP) 的應用已經很成熟也很普遍，常用於追蹤或者定量生物反應的存在與否，於生化、分生及細胞生物學等實驗中進行大量的基因表現掃瞄。GFP 早先發現於許多低等的腔腸動物之中，近年來 cloned GFP 的技術成果也很多，到目前為止，最被人了解與大量利用的蛋白分別是從水母 Aequorea Victoria 及珊瑚 Renilla reniformis 而來。

安捷倫採用珊瑚 R. reniformis 的 GFP 複製出 cDNA ，並且進一步將此蛋白的 RNA 序列重製轉為適合人類基因表現的密碼子 (codons)，這種人為重組的綠螢光蛋白稱為 hrGFP (humanized recombinant GFP)，而再進一步地，利用隨機突變的技術 (random mutagenesis)，來對 hrGFP 做改良及篩選，最後得到訊號更強的改良蛋白 hrGFP II，此 hrGFP II 和原本的 hrGFP 擁有相同的螢光光譜特性，主要的 excitation peak 在 500 nm、emission peak 在 506 nm。(如下圖光譜圖)

hrGFP II 經實驗比較，在 human、rodent 及 simian等不同的細胞株中 (fig 1)，皆能展現出比人造的強化綠螢光蛋白 EGFP (Aequorea) 擁有更高的螢光訊號表現 (fig 2)，此外，安捷倫的 hrGFP II 對於細胞毒性低，也能更穩定地於細胞中持續表現螢光。

Fig 1.hrGFP II 於不同細胞中的螢光表現

Fig2. 在不同的細胞中比較 hrGFP II 各種載體與 EGFP 載體的表現差異

安捷倫提供四種 hrGFP II 載體供您的動物細胞表現選擇，可針對您的不同實驗需求選擇最適合您的載體設計，只要使用螢光顯微鏡 (fluorescence microscopy) 或者流式細胞儀 (fluorescence-activated cell sorting, FACS) 就能輕易地觀察帶有 hrGFP II 蛋白的基因表現。此外安捷倫也提供 Vitality full length hrGFP antibody (#240141 及 #240142)，透過此抗體能辨識連接於您實驗蛋白 N 端或C端的 wild type GFP、hrGFP、甚或改良的 hrGFP II，適合各種實驗應用，如 western blotting、immunoprecipitation 和 flow cytometry。備註 : 因為來源物種差異，此 antibody 無法用於 Aequorea victoria 的 GFP variant, EGFP。

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載體設計

可表現出附加 hrGFP II 於 N 端的重組蛋白。

可表現出附加 hrGFP II 於 C 端的重組蛋白。

可做為 hrGFP II 來源的載體， hrGFP II 兩端含有 MCS，可使用限制酶將 hrGFP II 切下並接於任何您想使用的載體之中。

hrGFP II 接於 IRES (internal ribosome entry site) 後端，可用來單獨產生 reporter gene 而不用擔心受 fusion protein 的干擾，另外在目標基因的 C 端也有接有 3X FLAG 分子標幟，可為實驗帶來更方便的偵測與應用。

產品列表

貨號	產品	數量
240144	Vitality hrGFP II-C Mammalian Expression Vector Vitality hrGFP II-C 哺乳動物表現載體(組) 廠牌:Agilent	20 µg
240145	Vitality hrGFP II-N Mammalian Expression Vector Vitality hrGFP II-N 哺乳動物表現載體(組) 廠牌:Agilent	20 µg
240143	Vitality hrGFP II-1 Mammalian Expression Vector Vitality hrGFP II-1 哺乳動物表現載體(組) 廠牌:Agilent	20 µg
240157	Vitality IRES-hrGFP II Mammalian Expression Vector Vitality IRES-hrGFP II 哺乳動物表現載體(組) 廠牌:Agilent	20 µg
240141	Vitality Full Length hrGFP polyclonal Antibody Vitality 全長 hrGFP多株抗體(組) 廠牌:Agilent	20 µL
240142	Vitality Full Length hrGFP polyclonal Antibody Vitality 全長 hrGFP多株抗體(組) 廠牌:Agilent	100 µL
240241	Vitality Full Length hrGFP monoclonal antibody Vitality 全長 hrGFP單株抗體(組) 廠牌:Agilent	20 µL
240242	Vitality Full Length hrGFP monoclonal antibody Vitality 全長 hrGFP單株抗體(組) 廠牌:Agilent	100 µL

Vitality hrGFP II Mammalian Expression Vectors

• 方便偵測
• 比 EGFP 擁有更高的螢光亮度與更低的細胞毒性
• 提供 hrGFP 及 hrGFP II 的抗體可供選擇

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