EpiQuik Circulating Cell-Free DNA (cfDNA) Isolation Easy Kit
For isolation of small fragment circulating cfDNA from plasma or serum

EpiQuik 循環游離核酸 Cell-Free DNA (cfDNA) 純化套組

新一代 EpiQuik™ Circulating Cell-Free DNA (cfDNA) Isolation Easy Kit 採用磁珠吸附式的大小分離技術來從血漿(plasma) 或血清 (serum) 中簡單快速地純化 circulating cell-free DNA (cfDNA)，分離出的 cfDNA 可直接進行 real-time PCR 或者次世代定序的 DNA library 建置流程。

cfDNA 應用背景

近年的基因及表觀遺傳研究顯示，血漿血清或者體液中的 Circulating cell-free DNA (cfDNA) 存在著許多臨床疾病 (如癌症、自體免疫、感染或者新生兒病症等) 的前期判斷訊息因子，大多重要的臨床 cfDNA 片段都來自於 mononucleosome 的 170 bases 左右大小片段，少部分是從 di-nucleosome 而來的 360 bases 左右大小片段。在許多病理狀態如發炎反應、肺栓塞、自體免疫或者癌症時，這些 nucleosomal complexes 通常經由細胞凋亡 (apoptotic cell death) 過程來釋放至血液循環中，因此血清血漿的 cfDNA 片段大多分布於 170-500 bps，現在也逐漸被發展應用成更加精準的臨床與生理狀態檢測因子 (marker)。

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原理

EpiQuik™ Circulating Cell-Free DNA (cfDNA) Isolation Easy Kit 提供您從血漿 (plasma)/ 血清(serum) 簡單快速分離純化小片段 cfDNA 的所需試劑，circulating nucleosomal complexes 首先經由第一步酵素裂解將 DNA 釋放出來，而後 cfDNA 會被高效率的大小分離磁珠 (cfDNA Capture Beads) 抓取，透過磁座吸附 (可使用 EpiMagTM HT (96-Well) Magnetic Separator 或其他類似產品) 來進行雜質的去除與純化，最後純化的 cfDNA 被洗下就可直接用於後續實驗應用或進行保存。

適用樣品

新鮮或冷凍的血漿/ 血清皆可使用，但新鮮的樣品通常相比於冷凍的會有更好的 DNA 產率，每個樣品輛可從 0.1-1 ml，標準建議為 0.5 ml，若是血清樣品注意應於採血後 6 小時內進行實驗操作，避免周邊血液的淋巴細胞於血清分離時造成汙染誤差。

EpiQuik™ Circulating Cell-Free DNA (cfDNA) Isolation Easy Kit 實驗流程

cfDNA 高回收率 : 不同量的 HeLa mononucleosomes 分別加入至 0.5ml 的 plasma 中，用 EpiQuik™ Circulating Cell-Free DNA (cfDNA) Isolation Easy Kit 進行萃取，純化的 DNA 進行螢光定量結果。

使用 Bioanalyzer 進行 cfDNA 回收大小分析 : 500 ng 的 Hela polynucleosome (約 3000 bps) 及 500 ng 的 mononucleosome (約 170 bps) 同時加入至 0.5 ml plasma 並使用此試劑進行純化與後續大小判定結果。

產品列表

貨號	產品	數量
P-1065-25	EpiQuik Circulating Cell-Free DNA (cfDNA) Isolation Easy Kit 循環游離DNA簡易純化試劑套組 (組) 廠牌:Epigentek	25 isolations
P-1065-50	EpiQuik Circulating Cell-Free DNA (cfDNA) Isolation Easy Kit 循環游離DNA簡易純化試劑套組 (組) 廠牌:Epigentek	50 isolations

EpiQuik 循環游離核酸 Cell-Free DNA (cfDNA) 純化套組

• 只需 1 小時快速簡易的流程即可完成。
• 採用新一代磁珠大小分離技術。
• 純化的 cfDNA 可直接進行各種下游實驗。
• 能有效去除蛋白、鹽類、nucleases、PCR 抑制物、及各種雜質如多糖類、多酚或脂質。
• 高敏感度與高 DNA 擷取回收率 (>80% input mononucleosomal DNA)。

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P-1065 EpiQuik Circulating Cell-Free DNA (cfDNA) Isolation Easy Kit 說明書